熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) : 熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。 細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡是一種常用的顯微鏡,能夠觀察細胞、組織和分子水平的結構和功能。以下是熒光顯微鏡的使用方法及注意事項:
使用方法:
1、準備樣本
根據(jù)需要選擇合適的熒光染料,并對待觀察物進行標記。樣品必須保持濕潤且盡可能薄。
2、調節(jié)顯微鏡:
將熒光濾光片放在光源上,并選擇波長相應的熒光染料。調整目鏡和物鏡的焦距,以獲得清晰的圖像。
3、觀察樣品:
將樣品置于載玻片上,利用移動放大倍數(shù)和聚焦輪控制視野。觀察時要避免過度曝光,以防止熒光淬滅。
4、拍攝圖像:
可以使用數(shù)碼相機或者CCD攝像機記錄熒光信號。
注意事項:
1、熒光染料的選取要與觀察目標相匹配,否則會影響成像效果。
2、樣品處理需謹慎,避免讓熒光染料與其他化學物質反應,嚴禁使用有機溶劑。
3、必須保持顯微鏡和樣品的清潔,避免灰塵、指紋等雜質干擾成像。
4、在觀察過程中要避免熒光染料淬滅,因此要控制曝光時間和光強。同時,長時間使用也會造成熒光淬滅。
5、操作時需小心謹慎,避免損壞昂貴的熒光顯微鏡設備。
總之,熒光顯微鏡是一種非常有用的生物學工具,但需要仔細操作并注意以上事項,才能獲得準確的數(shù)據(jù)和圖像。